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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6869 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品參數:
產品名稱:克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Klebsiella spp.
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
HPMEC-c 人肺微內皮細胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-去氮腺嘌呤質量規格:美國原裝進口,97%3-Deazaneplanocin A HCl salt
神經元生長添加物NGS4-氧代維甲酰酚胺質量規格:美國原裝進口3-Keto Fenretinide
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-表米諾環素質量規格:美國原裝進口4-Epi Minocycline
大鼠氣管平滑肌細胞完全培養基 100mL牛磺脫氧膽酸鈉質量規格:>97%,BRTaurodeoxycholic acid salt
F81細胞,貓腎細胞 NCI-H838 [H838](人細胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21rU亞1酰胺單體質量規格:>98%,BRrU Phosphoramidite
人腎透明細胞癌;Caki-1SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100克BR,粘度200 mpe.s
NK-92細胞,人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞 人細胞系,Hep-3B細胞 CL-0184PANC-1(人細胞)5×106cells/瓶×2N.N-二基-1.3-炳二安 3-Diqthylcminopropylcminq 104-78-9
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24ProcyanidinB2原矢車菊素B2500ulAR,99%
SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基綠shēng huà shì jì容量:1公斤
平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid
EB病毒轉化的人B細胞;KM9801 人脈絡膜細胞完全培養基 100mL紫花前胡苷(標準品)Nodakenin質量規格:HPLC≥98%,標準品
滋養層細胞培養基TM-prf紫蓳靈(標準品)Corynoline質量規格:HPLC≥98%,標準品
EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細胞裂解液 (陽性對照) 紫云英苷(標準品)Astragaline質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠上皮細胞完全培養基 100mL棕櫚酸(標準品)Palmitic acid質量規格:HPLC≥98%,標準品
CV-1細胞,非洲綠猴腎細胞 HPAC(人細胞) CM-H010人小氣道上皮細胞完全培養基100mL王不留行黃酮苷(標準品)Vaccarin質量規格:HPLC≥98%,標準品
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒Hepa 1-6(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質母細胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美(標準品)Dexamethasone質量規格:HPLC>98%,標準品
人卵巢;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質量規格:>98%,BR
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸地爾硫卓(標準品)Diltiazem HCL 質量規格:含量測定,標準品
CL-0433RWPE-2(人正常細胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質量規格:美國進口
SL-7細胞,胚肺細胞 人上皮細胞,RWPE2細胞 人上皮細胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質量規格:>98.5%,BR
操作流程:
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。