日本乱人伦-日本乱人伦电影在线观看-日本乱人伦片中文三区-日本乱熟人妻精品中文字幕-日本乱熟人妻中文字幕乱码-日本乱偷人妻中文字

上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
您當(dāng)前的位置: 網(wǎng)站首頁 > 產(chǎn)品展廳 >熒光定量PCR試劑盒 >犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP6896
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-06-22
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP6896
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進(jìn)口

概述:
熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會相應(yīng)的增加,這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實時的監(jiān)測。產(chǎn)品僅供科研使用本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNARNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Macrococcus canis

BKP6896

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*的定量方法,已得到全世界的公認(rèn),廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

使用方法:
一、犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL610倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記6個離心管,分別為765432
3.
用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6.
換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8.
如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PCNC的體積也必須是200μL
9.
用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10.
如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加23倍。
11.
產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

熒光定量PCR服務(wù):
產(chǎn)品僅供科研使用簡介:實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的mRNA表達(dá)差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1
、熒光定量PCR服務(wù)要求:
01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
03)請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA 來源等
2
、熒光定量PCR操作程序
01)引物(探針)設(shè)計與合成。
02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA
03)進(jìn)行Real Time PCR實驗,進(jìn)行實驗結(jié)果分析。
04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料。
3
、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn):
 
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。
95-D細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL哌拉西林(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定Piperacillin

SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2哌拉西林質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPiperacillin

Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml鄰氯青霉素 ;氯唑西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cloxacillin  Salt Monohydrate

人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHDMEC cDNA鄰氯青霉素 ;氯唑西林鈉質(zhì)量規(guī)格:干品Cloxacillin>90%,一水Cloxacillin  Salt Monohydrate

HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-Deaza-7-I-2-dA質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分7-Deaza-7-I-2-dA
EB
病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0906 人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLRIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA貯存液生物技術(shù)級無色透明溶液COLDsigma

間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長添加物MODS1,6-1酸果糖一鈣鹽 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 103213-33-8 5G 通用試劑

IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 富馬醋;反二醋;;紫堇醋;12-1二羧醋 FuMcric ccid;Bolqtic ccid;Lichqnic ccid;trcns-1,2-qthylqnqdiccrboxylic ccid 110-17-8

人牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLAmmoniumfluoroborate四扶合硼酸25克高,98%

T6-Swiss albino細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-144-44-(-3)()potewwium permanganate
Hacat
人永生化角質(zhì)細(xì)胞鳶尾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Tectoridin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CM-R115大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鳶尾黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tectorigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞原B2(標(biāo)準(zhǔn)品)Procyanidin B2質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0920 人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL原人參二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Protopanaxdiol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X原人參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Protopanaxatriol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒CL-0382MDA-MB-415(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2丹酚酸B(標(biāo)準(zhǔn)品)Salvianolic acid B質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620] 大鼠真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丹酚酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)Salvianolic acid C質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞丹酚酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)Salvianolic acid D質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL17F Others Human IL-17F / Ierleukin-17F 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)Cholesterol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)Cholesterol質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA
模板
2
.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3
10×PCR Buffer
4
2mM dNTPmix:含dATPdCTPdGTPdTTP2mM
5
Taq
二、操作步驟
1
.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物110pM               2μl
引物210PM              2μl
Taq
酶(2U/μl            1μl
DNA
模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72 保溫7min
3
.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。


聯(lián)系方式
手機(jī):13564080845
主站蜘蛛池模板: 国产在线观看无遮挡 | 在线观看国产高清免费 | 爆乳无码一区二区在线观看ai | 97久久婷婷五月综合色d啪蜜芽 | 亚洲欧美手机在线观看 | 97在线视频人妻无码 | 亚洲国产精品人人做人人 | 99国产这里有精品视频2025 | 欧美丰满熟妇xx猛交 | 性生交片免费无码看人 | 在线观看成本人 | 国产精品一区在线观看播放 | 成人视频 | 欧美日韩国产一区二区精品合集 | 99精品久久久久精品双飞 | 亚洲午夜电影伦理在线观看 | 麻豆精品一区二区视频在线 | 不卡的av在线系列 | 国产91福利 | 国产偷倩视频 | 在线播放午夜理论片 | 国产精品毛片久久久久久 | 国内视频在线精品一区 | 国产91福利在线精 | 国产在线98福利播放视频免费 | 成人午夜视频在线观看 | 国产99视频精品免费视看9 | 91色视频在线观看 | 国产98在线 | av电影中文字幕在线观看 | 国产精品一久久香蕉国产线看观看 | 亚洲一区二区三区不卡在线播放 | 韩国午夜理伦三级在线观看中文版 | 在线观看免费av无码不卡 | 国产超级va在线观看视频 | 成人自拍一区 | 中文字幕日韩视频在线观看 | 三区麻豆 | 午夜a级理论片在线播放不卡 | 亚洲综合精品一区二区三区中文 | 久久99国产精一区二区三区 |