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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7137 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品參數:
產品名稱:鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Renibacterium salmoninarum
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RSC, 大鼠雪旺細胞偶氮脒類引發劑V65100毫克保存:-20℃
轉化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養基 100mL2,3-務二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6
人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠血清(無菌)100克RT
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)2-脫氧鳥苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA
細胞名稱 種屬二水合錄化鈣,英文名或英文縮寫:Calcium chloride dihydrate,級別:AR,99.5%,規格:250毫克
CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧化輔酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0
大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學級透明無色液體COLDsigma
人主動脈內皮細胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇,英文名或英文縮寫:2-etxyl-1-butanol,級別:高,99%,規格:25克
CL-0019AAV-293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基硫酸鋰Lithium Dodecyl Sulfate質量規格:>98%,分子生物學級
CM-R094大鼠胎兒表皮角質形成層細胞完全培養基100mL硫代甜菜堿 8Sulfobetaine 8質量規格:>98%,sigma分裝
HEC-1A, 人細胞系 肝細胞,BRL細胞 TE 115.T(人軟組織細胞)硫代甜菜堿 10Sulfobetaine 10質量規格:>98%,BR
小鼠細胞;L1210硫代甜菜堿 12Sulfobetaine 12,SDDAB質量規格:>98%,BR
EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 恩他卡朋;COMT抑制劑Entacapone質量規格:>99%,BR
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅試劑Zincon質量規格:螯合劑
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide質量規格:>92.0%(GC)
U373細胞,人腦細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-*基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole質量規格:>98.0%(T)
SK-N-BE(2) (人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2N-*基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide質量規格:>98.0%(GC)
HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane質量規格:>97.0%(GC)
操作流程:
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。