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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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蛙屬虹彩病毒(RIV)PCR檢測方法(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P63978
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-10-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P63978
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產品名稱

規格

貨號

蛙屬虹彩病毒(RIV)PCR檢測方法(熒光-PCR)

50T

BK-P63978

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠性激素結合球蛋白(mouse SHBG)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Methenolone acetate  中文名:美替諾龍醋酸酯  分子式:C22H32O3  度:98.0%

小鼠信號轉導分子7(Smad7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Methoxydienone  2322-77-2  中文名:沃氏物  分子式:C20H28O2 

小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒   小鼠新生甲狀腺素試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠新生甲狀腺素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Methasterone  中文名:甲基屈他雄酮  分子式:C21H34O2  度:98.0%

小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Metamizole   中文名:安乃近  分子式:C13H16N3NaO4S  度:98.0%

小鼠心肽elisa試劑盒   小鼠心肽試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠心肽試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠心肽試劑盒、小鼠心肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Betamethasone  中文名:倍他米松  分子式:C22H29FO5
NK-92細胞,惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞 細胞系,Hep-3B細胞 CL-0184PANC-1(*癌細胞)5×106cells/瓶×2二硫代乙酰胺(>98%,BR)Dithiooxamide質量規格:>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24脫氧核糖核酸酶 IIDNase II, from Pocine Pancreas質量規格:分子生物學級

SLAMF1 Others Human  CD150 細胞裂解液 (陽性對照) 5-硝基吲哚(>98.0%(GC))5-Nitroindole質量規格:>98.0%(GC)

平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)鋁酞菁(>98.0%(T))Phthalocyanine Chloroaluminum質量規格:>98.0%(T)

HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 細胞裂解液 (陽性對照) 酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)質量規格:>98.0%(T)
Y2細胞,小鼠成纖維細胞 順鉑耐藥株,COC1/CDDP細胞 食道上皮細胞裂解物HEEpiCL十五氟辛酸(5mmol)[離子對色譜級]IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)質量規格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑

非洲綠猴腎細胞;CV-1十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級]IPC-PFFA-8 HG質量規格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑

IGFBP3 Others Human  IGFBP3 / IBP3 細胞裂解液 (陽性對照) 9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對色譜級]IPA-DAS質量規格:用于氨類的熒光離子對試劑

兔角膜前基質層成纖維細胞;RCFBF敵草隆(標準品)Diuron質量規格:分析標準品,99.5%

MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 茜素紅Alizarin red質量規格:AR
α-Spinasterol  481-18-5  中文名:α-菠甾醇  分子式:C29H48O  度:97.0%  關鍵詞:  ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名:α-硫辛酸  分子式:C8H14O2S2  度:98.5%  關鍵詞:  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠抗核抗體(mouse ANA)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

α-Lapachone  4707-33-9  中文名:  分子式:C15H14O3  度:98.0%  關鍵詞:  萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠緊張素II(mouse ANG II)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  

α-D-Glucose  492-62-6  中文名:α-D-葡萄糖  分子式:C6H12O6  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠脂肪酸合成酶   英文名稱:   Mouse Fatty Acid Syhase   規格:   48T/96T   英文縮寫:   FAS

  蛙屬虹彩病毒(RIV)PCR檢測方法(熒光-PCR法)  中文名:佐匹克隆  分子式:C17H17ClN6O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠促卵泡生成激素   英文名稱:   Mouse Follicle Stimulating Hormone   規格:   48T/96T   英文縮寫:   FSH

本產品只適用于科研,

聯系方式
手機:13564080845
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