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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒熒光法
  • 品牌:帛科
  • 產地:國產
  • 型號:100管/96樣
  • 貨號:BK-S01410
  • 發布日期: 2020-10-19
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 國產
品牌 帛科
貨號 BK-S01410
用途 公司產品僅用于科研
英文名稱
包裝規格 100管/96樣
純度 詳見說明書%
CAS編號
別名 線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒
分子式
是否進口

商品介紹:

測定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應激與細胞生長增殖、發育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關。

正常情況下,細胞內抗氧化防御系統與氧自由基處于平衡狀態,細胞內活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細胞內抗氧化系統與氧自由基的平衡被打破,細胞內活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機體出現氧化應激,同時,活性氧還可攻擊線粒體DNA產生氧化損傷,導致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結構和功能變化。

因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據上述原理設計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數據點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標儀、恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水。

基本信息:

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒熒光法

熒光法

100管/96樣

BK-S01410

特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。產品僅用于科研
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速

實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。

操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
人CD30分子elisa試劑盒   人CD30分子試劑盒   規格型號:96T/48T   人CD30分子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人CD30分子試劑盒、人CD30分子elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。     Schleicheol 1  256445-66-6  中文名:  分子式:C30H52O2

人CD14分子elisa試劑盒   人CD14分子試劑盒   規格型號:96T/48T   人CD14分子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人CD14分子試劑盒、人CD14分子elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。     Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名:17-安息香酸雄烯醇酮  分子式:C26H32O3

人B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine   中文名:  分子式:C9H10Cl2F3NO  度:98.0%

人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Aminofluorene  153-78-6  中文名:2-氨基芴  分子式:C13H11N

人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式:C5H12O4
兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名:  分子式:C8H8OS2

兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名:6-氨基青霉烷酸  分子式:C8H12N2O3S

兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminonicotinic acid  中文名:6-氨基煙酸  分子式:C6H6N2O2  度:98.0%

兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Aminoindole  5318-27-4  中文名:6-氨基吲哚  分子式:C8H8N2

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           6-Aminonicotinic acid  中文名:6-氨基煙酸  分子式:C6H6N2O2
9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名:9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式:C27H24N2 奈瑟菌通用型(NM-U)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名:4-苯甲?;?3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2 奈瑟菌通用型(NM-U)試劑盒   48T

5-Benzyloxyindole  1215-59-4  中文名:5-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO    噬酸性粒細胞趨化因子 -2(Eotaxin-2)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  3479-47-8  中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂  分子式:C19H19NO6    (EPO)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

4-Benzoyloxy-2-azetidinone  28562-58-5  中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環丁酮  分子式:C10H9NO3    受體 ( EPO Receipter)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝
線粒體活性氧產生速率(ROS)測試盒熒光法Benzofuroxan  480-96-6  中文名:苯并呋咱  分子式:C6H4N2O2    山羊壞死因子αelisa試劑盒   山羊壞死因子α試劑盒   規格型號:96T/48T   山羊壞死因子α試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:山羊壞死因子α試劑盒、山羊壞死因子α elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。

(2-Benzothiazolylthio)acetic acid  6295-57-4  中文名:2-(苯并噻唑基硫代)乙酸  分子式:C9H7NO2S2    山羊生長激素釋放多肽elisa試劑盒   山羊生長激素釋放多肽試劑盒   規格型號:96T/48T   山羊生長激素釋放多肽試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:山羊生長激素釋放多肽試劑盒、山羊生長激素釋放多肽elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名:蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式:C14H6Na2O8S2    山羊白介素4elisa試劑盒   山羊白介素4試劑盒   規格型號:96T/48T   山羊白介素4試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:山羊白介素4試劑盒、山羊白介素4 elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。

2-(Morpholinodithio)benzothiazole  95-32-9  中文名:2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑  分子式:C11H12N2OS3    山羊白介素10elisa試劑盒   山羊白介素10試劑盒   規格型號:96T/48T   山羊白介素10試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:山羊白介素10試劑盒、山羊白介素10 elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質期:6個月。

(1S,2R)-1-Amino-2-indanol  126456-43-7  中文名:(1S,2R)-1-氨基-2-茚醇  分子式:C9H11NO    山羊壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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