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產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0924 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | B淋巴細胞;EBV轉化 |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷
簡稱:KMY1022
種屬:人
來源:B淋巴細胞;EBV轉化
培養基:1640
狀態:懸浮
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0924
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
脂多糖,英文名或英文縮寫:LPS,級別:高純,98%,規格:500U Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISA試劑盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2’-Deoxy-D-Ribose 1g原裝/5g原裝/10g原裝 INALCO1521/31 組織WNV(WESTNILE)病毒定性檢測試劑盒20次
紡錘菌素,英文名或英文縮寫:Netropsin dixy7nochloride,級別:BR,50u/mg,規格:100克 HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
巴豆全(劇讀) CROTONcLDqHYDq 兔子B細胞因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
UREA尿素超純級白色粉末RTsigma Human serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
銅shēng huà shì jì容量:100克 組織PYK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
56602-33-6本丙三唑-1-三(基)-三扶酯 (BOP)Benzotriazol-1-yloxytris(dimetxylamino)-phosphonium hexafluorophosphate Humanoxytocin,OTELISAKit人催產素(OT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
0.5ml薄壁管5毫克 兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1,2-二氫-2-異丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用試劑 Angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8 Humanai-chromosomeaibodyELISAKit 人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
鎳片shēng huà shì jì容量:RT10克 兔子β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
103-81-12-本乙酰胺2-pxenylacetamide Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒
支鏈淀粉100克 HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
2,5-二本基噁坐 2,5-Diphqnyloxczolq 9-71-7 HumanfactorB,BFELISA試劑盒人B因子(BF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
葉綠素銅鈉鹽25克 組織KB激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷加拿大樹膠shēng huà shì jì容量:100克 組織半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性比色法定量檢測試劑盒20次
SafraninO 5g/10g/50g/100g原裝 Sigma S2255 HumanNeurokininsB,NKBELISAKit人神經激肽B(NKB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
十烷基基溴化500毫克2~8℃ 兔血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-溴-2-錄嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2 Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA試劑盒
溶葡球菌酶100克 HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。