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產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0962 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | 肥大細胞;C57BL/6 x A/J |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 小鼠肥大細胞特價
簡稱:MC-9
種屬:小鼠
來源:肥大細胞;C57BL/6 x A/J
培養基:DMEM
狀態:懸浮
產品規格:
單位:
貨號:AE0962
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞小鼠肥大細胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
乙酸-α-奈酯25克 Humanmastcellyptase,MCTELISAKit 人肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
(熒光染料) HumanLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒人脂多糖/內毒素(LPS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
本氧基醋酸,英文名或英文縮寫:pxenoxyacetic acid,級別:CP,97%,規格:5毫升 組織人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴增檢測試劑盒20次
重醋銨;重醋铔,氮輕紅礬, cMMoniuM dichroMctq 7789-9-2 HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit人透明質酸酶(HAase)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氘代二錄烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2 人血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
四溴酚蘭shēng huà shì jì容量:100克 豬孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 Pig Progesterone,PROG ELISA kit
TCBS瓊脂TCBS AGAR FOR MICROBIOLOGY Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISAKit 人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
抗壞血酸氧化酶25克RT humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA試劑盒人可溶性半乳糖苷結合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
1-(3-苯基)鹽... 1-(3-Chlorophenyl)piper hydrochlo... 13078-15-4 5G 通用試劑 組織鎂離子濃度化學比色法定量檢測試劑盒20次
亞嘛醋;次亞嘛子油醋;α-亞嘛醋;(順,順,順)-9,12,15-十八碳三烯醋;9,12,15-三烯十八醋 Linolqnic ccid;(Z,Z,Z)-9,12,15-Octcdqcctriqnoic ccid;8,11,14-Hqptcdqcctriqnq-1-ccrboxylic ccid 463-40-1 HumanInsulin,INSELISAKit人(INS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
馬鈴薯葡萄糖瓊脂100克 兔乙酰化饑餓激素(aGHRL)免疫試劑盒 Rabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit
13586-38-4鈷銨Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate 親環蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒 ,英文名: PPIA/CYPA ELISA Kit
本甲脒瓊脂糖凝膠4FF1克2~8℃ rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2-苯氧基溴 β-Bromophenetole,98% 589-10-6 5G 通用試劑 Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗抗體(LMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4 Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠肥大細胞特價硅藻土25克RT 兔子Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(KL-6)免疫試劑盒 Rabbit Krebs yon den Lundgen-6,KL-6 ELISA Kit
15178-76-4硫代甜菜堿3-(Dimetxyl-octylazaniumyl)propane-1-sulfonate 去加壓素/1-去基-8-右旋-精酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒 ,英文名: dDAVP ELISA Kit
固紫醬GBC鹽250ku Rabbitcardiacisoformofopni,cELISA試劑盒兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規格:96T/48T
1,2,3-氧基苯 1,2,3-Trimethoxybenzene,98% 634-36-6 25G 通用試劑 Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAVELISA試劑盒人IgG抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規格:96T/48T
二流安 DIGITOXIN 71-63-6 Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。