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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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錦鯉病毒(KHV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63972
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-03
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63972
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進(jìn)口

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

錦鯉病毒(KHV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR)

50T

BK-P63972

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,43,2
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱:   Fibronectin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   FN  Memantine   中文名:鹽酸美金剛胺  分子式:C12H22ClN  度:98.0%

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱:    fibronecti   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   FN  Memantine   41100-52-1  中文名:鹽酸美金剛胺  分子式:C12H22ClN 

小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid  147027-10-9  中文名:  分子式:C18H27N3O4S 

小鼠纖維蛋白肽BFPBELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mequindox  13297-17-1  中文名:乙酰甲喹  分子式:C11H10N2O3  度:98.0%   

小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Mequindox  13297-17-1  中文名:乙酰甲喹  分子式:C11H10N2O3
CN3 Others Human  CN3 / Coactin-3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芹菜素質(zhì)量規(guī)格:HPLC97%,BRApigenin

大鼠*瘤細(xì)胞;IR983F芹菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Apigenin

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氧化鉍質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%Bismuth oxide

胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2--1,3-質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝,98%2-Chloro-1,3-propanediol

GNM細(xì)胞,上頜牙齦癌頸結(jié)轉(zhuǎn)移癌 宋氏志賀氏菌 APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0富馬酸比索洛爾質(zhì)量規(guī)格:>99%Bisoprolol fumarate
Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1硫酸小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Berberine hydrogen sulphate質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML噻嗪二酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Xanthiazone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CLEC7A Others Human  CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 噻嗪二酮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Xanthiside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

細(xì)胞;MKN-45多被銀蓮花皂苷R8(標(biāo)準(zhǔn)品)Raddeanoside R8質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠*癌細(xì)胞(B);Pan02 透明質(zhì)酸酶(100mL酶解緩沖液) 10mL虎掌草皂甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)無質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Uzarigenin 466-09-1  中文名:  分子式:C23H34O4  度:97.5%  關(guān)鍵詞:  強(qiáng)心劑; ; 強(qiáng)心苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

ucralose  56038-13-2  中文名:三氯蔗糖  分子式:C12H19Cl3O8  度:99.0%  關(guān)鍵詞:  人工甜味劑; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Tryptophan  153-94-6  中文名:  分子式:C11H12N2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠孕激素/(PROG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Troxerutin  7085-55-4  中文名:曲克蘆丁  分子式:C33H42O19  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

錦鯉病毒(KHV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)Tropisetron   105826-92-4  中文名:鹽酸托烷司瓊  分子式:C17H21ClN2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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