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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3623 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腸粘附性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應 | Enteroadhesive E.Coli(EAEC)PCR | BKP3623 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:腸粘附性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
HMy2.CIR細胞,人B母細胞 人細胞,H7402細胞 CL-0200RWPE1(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2D-GalactoseD-(+)-葡萄糖25UACS級,99%
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K11.3-環己二同,98% 1,3-Cyclohqxcnqdionq 204-0-9
LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋亞工 MqRCUROUS SULFcTq 7783-36-0
猴源細胞甘酰-甘酰-L-纈酸,英文名或英文縮寫:Gly-Gly-Val,級別:BR,98%,規格:1克
CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照) 13472-85-05-溴-2-甲氧基5-Bromo-2-metxoxypyridine
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A吲哚(standard for GC,>99.5%(GC))Indole質量規格:standard for GC,>99.5%(GC)
DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 辛酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC))Ethyl octanoate質量規格:Standard for GC,>99%(GC)
CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)5×106cells/瓶×2異辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC))2-Ethyl-1-hexanol質量規格:standard for GC, ≥99.5% (GC)
U266B1 [U266], 人細胞 細胞,Saos-2細胞 CFPAC-1(細胞)棕櫚酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC))Ethyl palmitate質量規格:standard for GC,≥99%(GC)
小鼠;P19異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Ethylhexanoic acid質量規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
腸粘附性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應人平滑肌細胞RNAHCSMC miRNA5 μg醋酸地塞米Dexamethasone Acetate質量規格:>98%,BP,BR,可用于細胞培養
TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸地塞米(標準品)Dexamethasone Acetate質量規格:HPLC>98%,標準品
GIST 人細胞甲氧芐啶Trimethoprim質量規格:>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細胞培養
CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2甲氧芐啶(標準品)Trimethoprim質量規格:HPLC>98%,標準品
人少突膠質細胞西維來司鈉Sivelestat 質量規格:含量大于98.5%
小鼠;P193-吲哚酸,英文名或英文縮寫:IAA,級別:超,99%,規格:100KU
Acc-3細胞,涎腺腺樣囊性癌細胞 人細胞,BSG823細胞 犬胸腺細胞;cf2Th滌蠟 Cqrqsin; Minqrcl wcx; Cqrosin; Cqrin; Purifiqd ozokqritq; 8001-72-0
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3BIS-2甲叉雙酰胺, 2%溶液超級透明無色液體COLDsigma
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙二酸鈦鉀,英文名或英文縮寫:potewwium titanyl oxalate dihydrate,級別:CP,98.5%,規格:100克
人骨骼肌細胞HSkMCMEM EARLES培養基(+4℃)NA