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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3643 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腸道病毒通用PCR檢測試劑盒供應 | Enterovirus(EV)RTPCR | BKP3643 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NCI-295R細胞,人腎上腺皮質腺癌細胞 小鼠艾氏腹水瘤細胞TCM15,S180細胞 CL-0226SW626(人細胞)5×106cells/瓶×2DL-Isocitricacidtriwo7iumsaltDL-異檸檬酸鈉100克BR,95%
WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×22′-脫氧鳥苷 -15N2,99% 961-07-9 250MG 通用試劑
HCASMC-c 人平滑肌細胞(HCASMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)己二晴;二晴;1,4-二青基丁烷 Hqxcnqdinitnilq;1,4-Dicycnobutcnq;TqtrcMqthylqnq dicycnidq;cdipic dinitnilq
肝竇內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)KANAMYCINSULFATE卡那霉素美國藥典級白色至米白色精細粉末RTsigma
CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細胞裂解液 (陽性對照) 對磺酰-L-精酸鹽酸鹽Na-p-Tosyl-L-argineine metxyl estar xy7nochloride
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12鹽酸左氧氟沙星Levofloxacin HCl質量規格:>98.5%,BR,可用于細胞培養
心房成纖維細胞 (HCFaa)( 5×105 )鹽酸左氧氟沙星(標準品)Levofloxacin HCl質量規格:>98%,標準品
CM-M121小鼠角膜內皮細胞完全培養基100mL俾士麥棕,俾士麥棕RBismarck Brown R質量規格:BS
野生型人c-kit受體細胞株;A7d 小鼠肺動脈成纖維細胞完全培養基 100mL1酸泰樂菌素,1酸泰洛星Tylosin Tartrate質量規格:BR
小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) Mouse1酸泰樂菌素(標準品)Tylosin Tartrate質量規格:含量測定
腸道病毒通用PCR檢測試劑盒供應人骨骼肌衛星細胞cDNAHSkMSC cDNA苯甲酰烏頭原堿(標準品)Benzoylhypacoitine質量規格:HPLC≥98%,標準品
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯甲酰烏頭原堿(標準品)Benzoylaconine質量規格:HPLC≥98%,標準品
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C8蝙蝠葛堿(標準品)Dauricine質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL表白樺脂酸(標準品)Epibetulinic acid質量規格:HPLC≥99%,標準品
細胞名稱 種屬表兒茶素(標準品)Epicatechin (EC)質量規格:HPLC≥98%,標準品
CW-2 人細胞沒食子酸100毫克
HT-29人細胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's *+10%FBS姆沙伯 108 CHROMOSORB(R) 108 8902/8/6
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽)1,4-雙(5-苯基-2-惡... 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene (... 1806-34-4 5G 通用試劑
人虹狀體上皮細胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 Human氫氧化100克
人T瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77(+)Glucose
特點優勢:
1. 特異性:腸道病毒通用PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。