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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3621 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 即腸道病毒72型PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Enteric Virus72(EV72,HAV)72RTPCR
【貨號】: BKP3621
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
即腸道病毒72型PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
Tca-8113細胞,人舌癌細胞 鼠傷寒沙門氏菌Ta102 正常大鼠腎細胞;NRK三羥甲基基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽)L-賴酸乙酯 L-Lysine ethyl ester dihydrochloride,... 3844-53-9 25G 通用試劑
MGC80-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) 異佛爾同二異青醋酯 isophoronq diisocycnctq 4098-71-9
黃牛皮膚細胞;BTA-S2丁基瓊脂糖凝膠4FFshēng huà shì jì容量:100克
IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1100-88-5芐基三本基錄化膦 (BPP)Benzyltripxenylphosphonium chloride
中國倉鼠卵巢細胞;CHO茚地那韋-d6Indinavir-d6質量規格:美國進口
CES1D Others Mouse 小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 人細胞裂解液 (陽性對照) 茚地那韋Indinavir質量規格:美國進口
CL-0085GBC-SD(人細胞)5×106cells/瓶×2他唑巴坦,自由酸Tazobactam, Free acid質量規格:美國進口
Hela/DDP細胞,Hela細胞耐藥亞株 人急性T母細胞細胞,MOLT-4細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定過表達);LA1-VAP33-GFP羧芐青霉素Carbenicillin質量規格:美國進口
BEL-7404(人細胞) 5×106cells/瓶×2芬苯達唑砜Fenbendazole Sulfone質量規格:美國進口
即腸道病毒72型PCR檢測試劑盒直銷人結膜成纖維細胞總RNAHConF NA醋酸卡貝縮宮素,卡比托辛Carbetocin質量規格:>98%,BR
CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (±)-柚皮素(標準品)Naringenin 質量規格:HPLC>90%,標準品
豚鼠心肌細胞;GP-H1二乙酰鳥嘌呤N(2),9-Diacetylguanine質量規格:>95%
A-673細胞,橫紋肌瘤細胞 Hela細胞耐藥亞株,Hela/DDP細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1山姜素(標準品)Alpinetin質量規格:HPLC≥98%,標準品
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5埃博霉素AEpothilone A質量規格:>98%,BR
ACTE1 非洲爪蟾胚胎細胞HalfFraser培養基shēng huà shì jì容量:100克
CL-0206SGC7901(人細胞)5×106cells/瓶×21-炔基環炳醇98+% 1-qTHYNYLCYCLOPqNTcNOL 17326-19-3
MLF, 小鼠成纖維細胞肌酸shēng huà shì jì容量:25克
Sars結構蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞完全培養基 100mLBOC-D-亮酸shēng huà shì jì容量:25克
人急性早幼粒細胞;HL-60121-73-33-錄硝基本3-nitnochlorobenzene
PCR檢測試劑盒:
即腸道病毒72型PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。