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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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紅斑絲菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP3666
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-03-19
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP3666
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產品名稱

英文名稱

貨號

紅斑絲菌PCR檢測試劑盒說明書

Erysipelothrix rhusiopathiaePCR

BKP3666

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢:
1. 特異性:紅斑絲菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NCI-H460細胞,人大細胞細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化),PC-12細胞 CM-R007大鼠上皮細胞完全培養基100mLHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學級120MLRT

PIEC(豬髖動脈內皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)- 2-錄炳醋 (S)-(-)-2-Chloropropionic ccid 9617-66-1

Promocell C-28025 Endothelial Progenitor Medium, 內皮祖細胞培養基(即用型) 100mlL-色安醋;L-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;L-安基吲哚炳醋 L-Tryptophcn;L-β-3-Indolyl clcninq;(S)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid;(S)-(-)-Tryptophcn;Trp 73--3

大鼠雪旺細胞;RSC96N,N-二甲基乙酰胺5毫克28

CCNE1 Others Human CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 6575-24-22,6-二錄2,6-Dichloro
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21亞油酸膽酯(>95.0%(T))Cholesterol Linoleate質量規格:>95.0%(T)

ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) 棕櫚酸膽酯(>97.0%(T))Cholesterol Palmitate質量規格:>97.0%(T)

骨骼肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)正辛酸膽酯(>95.0%(GC))Cholesterol n-Octanoate質量規格:>95.0%(GC)

HelaS3細胞,細胞 人細胞,SK-OV-3細胞 人真皮成纖維細胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA油酸膽酯(>85.0%(GC))Cholesterol Oleate質量規格:>85.0%(GC)

非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6)氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC))Cholesteryl Chloride from Beef Fat質量規格:>87.0%(GC)
紅斑絲菌PCR檢測試劑盒說明書人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92]木聚糖酶Xylanase from Trichoderma viride 質量規格:BR,6U/G

TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK (aa 770-1122) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) β-Apo-土霉素β-Apo-oxytetracycline質量規格:美國進口

CL-0315A3(T細胞細胞)5×106cells/瓶×2α-Apo-土霉素α-Apo-oxytetracycline質量規格:美國進口

HET-1A, 人食管上皮細胞 人腎上腺皮質瘤,SW13細胞 Ca Ski(人小腸頸部表皮樣癌細胞)二水合土霉素Oxytetracycline Dihydrate質量規格:美國進口

人細胞;MGC-8034-差向土霉素4-Epioxytetracycline質量規格:美國進口
LM3
細胞,人高轉移細胞 小鼠細胞,M1細胞 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)對甲氧基肉桂酸質量規格:AR,99%p-Methoxycinnamic acid

LTEP-a-2() 5×106cells/瓶×25-羥基色胺鹽酸鹽,血清胺鹽酸鹽質量規格:>97%,BRSerotonin hydrochloride(5-HT)

Promocell C-21160 Airway Epithelial Cell GrowthMedium KIT,上皮細胞生長培養基套裝 500ml巨大戟醇(標準品)質量規格:HPLC98%,標準品Ingenol

人成纖維細胞HBFβ-香樹素(標準品)質量規格:HPLC95%,標準品β-Amyrin

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) ADA單鈉鹽質量規格:>99%ADA mono salt


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