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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3674 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Eurytrema ovisPCR | BKP3674 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NCI-H661細胞,人大細胞細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化),PC-12細胞 CM-R015大鼠胰島細胞完全培養基100mLAspartame阿司帕坦5克BR,99%
PK-15(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×21,2,4-三酰氧基本 1,2,4-Triccqtoxybqnzqnq 613-03-6
Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 單核細胞培養基(即用型) 500ml間基紅;隊二安基偶氮本間羧醋 M-Mqthyl rqd 0691-84-3
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)5-nitnouracil2,4-二羥基-5-硝基嘧啶25克BR,97%
PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GDX 201(聚二本多孔小球)NA
小鼠原B細胞株;BaF3頭孢氨芐(標準品)Cephalexin質量規格:>98%,標準品
FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人細胞裂解液 (陽性對照) 赤霉素GA3Gibberellic acid(GA3 )質量規格:>90%,BR
MDA-MB-157 癌氯霉素Chloramphenicol質量規格:>99%,BR
CCD-1095Sk人浸潤性導管癌旁皮膚細胞 CCD-1095Sk human breast infilating duct carcinoma adjace skin cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS氯霉素(標準品)Chloramphenicol質量規格:>99%,標準品
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標簽)氯霉素(植物細胞培養級)Chloramphenicol質量規格:>99%,用于植物細胞培養
羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒說明書人腸微內皮細胞cDNAHIMEC cDNA阿西美辛Acemetacin質量規格:>98%,BR
PLAUR Others Human 人 uPAR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰基咪唑(>98.0%(GC)(T))N-Acetylimidazole質量規格:>98.0%(GC)(T)
3T6 Swiss albion小鼠胚胎成纖維細胞1-(七氟丁酰)咪唑(>97.0%(GC)(T))1-(Heptafluorobutyryl)imidazole 質量規格:>97.0%(GC)(T)
CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2五氟芐溴(>98.0%(GC))Pentafluorobenzyl Bromide質量規格:>98.0%(GC)
MN-s, 小鼠紋狀體神經元O-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥胺鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(N))O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride質量規格:>98.0%(HPLC)(N)
CL-0150MDA-MB-231(人癌細胞)5×106cells/瓶×24.1-66kDa低范圍分子量MARKshēng huà shì jì容量:保存:-20℃5克
MN-c, 小鼠皮質神經元炳1醋異務酯(含輕醌作為穩定劑) cCRYLIC cCID ISOcMYL qSTqR 442-32-6
腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293 人腎足突細胞完全培養基 100mL鳥苷 Guanosine (≥98%, cell culture tested) 118-00-3 5G 核酸衍生物
人平滑肌細胞RNAHPSMC miRNA5 μg1-溴代庚烷shēng huà shì jì容量:2~8℃250毫克
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照) fonmemi7e,Deionized 100ml/250ml Amresco分裝
特點優勢:
1. 特異性:羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。