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| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3774 |
| 用途 | 公司產品僅用物科研 |
| 包裝規格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
【產品名稱】: 哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Hazara VirusRTPCR
【貨號】: BKP3774
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。
組成及試劑配制:
酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
人尿道上皮細胞(HUC)(5×105) 人羊膜上皮細胞 Human堅牢紅鹽，英文名或英文縮寫：Fast red GG salt，級別：高，65%，蘋果來源，規格：1克
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F(S)-(-)-叔丁基亞磺酰安 (S)-(-)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 343338-8-3
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) L-酪安醋;;;L-β-隊羌本基-α-安基炳醋;L-干酪安基醋 L-Tyrosinq;(S)-2-cMino-3-(4-xy7noxyphqnyl)propionic ccid;3-(4-xy7noxyphqnyl)-L-clcninq;L-α-cMino-β-p-xy7noxyphqnylpropionic ccid;L-α-cMino- p-xy7noxyxy7nocinncMic ccid 60-18-4
T-107A中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mLGENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技術級500MLCOLD
HEp-2細胞，人喉表皮樣癌細胞 人臍內皮細胞,HUVE-12/CRL2480細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-2162778-12-5N，N-二甲基對本草酸鹽N,N-Dimetxyl-1,4-pxenylenediamine oxalate
人成纖維細胞完全培養基 100mL煙酸乙酯(>98%,BR)Ethyl nicotinate質量規格：>98%,BR
HS-4細胞，人細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12二茂鐵Ferrocene質量規格：>98%
XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標簽)反苯環丙胺鹽酸鹽；單胺氧化酶(MAO)抑制劑Tranylcypromine (2-PCPA) HCl質量規格：>97%,單胺氧化酶(MAO)抑制劑
ME-180(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細胞裂解液 (陽性對照) 黃胺酸(>96.5%，BS)Flavianic acid hydrate質量規格：>96.5%，BS
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21酸性品紅鈣(>60%，BS)Fuchsin acid calcium salt質量規格：>60%，BS
C57BL/6小鼠骨髓間質干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cellsAc-YVAD-肽核酸Ac-YVAD-pNA質量規格：>95%,BR
HME6細胞，人色素瘤細胞 動物雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919β-丙內酯(>95.0%(GC)(T))β-Propiolactone質量規格：>95.0%(GC)(T)
UMR-106(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×2DL-丙交酯(>98.0%(T))DL-Lactide質量規格：>98.0%(T)
Hut-102(人皮膚T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株 EB病毒轉化的人B細胞;KMY1022L-(-)-交酯(>98.0%(T))L-(-)-Lactide質量規格：>98.0%(T)
人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92]δ-戊內酯(>98.0%(GC))δ-Valerolactone質量規格：>98.0%(GC)
哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒說明書615小鼠網織細胞性瘤株;L615 小鼠腎足突細胞完全培養基 100mL10-脫乙酰巴卡亭質量規格：>98%,BR10-Deacetylbaccatin III
人絨毛膜內皮細胞 Human維生素B1(標準品)質量規格：HPLC≥99%，標準品vitamin B1
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素B1質量規格：>99%,USPVitamin B1
人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC維生素B12(標準品)質量規格：HPLC≥99%，標準品vitamin B12
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))質量規格：>95.0%(GC)10-Undecyn-1-ol
PCR檢測試劑盒
哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
