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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3789 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒4型PCR檢測試劑盒直銷 | Hepatitis C Virus(HCV)4RTPCR | BKP3789 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]鹽酸甜菜堿,英文名或英文縮寫:Betaine HC1,級別:高,96%,規格:1克
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照) 肖醋銫(易制暴) Cqsium nitnctq 7789-18-6
人上皮細胞完全培養基 100mLD-SORBITOLD- 山梨醇*白色顆粒粉末RTsigma
Tca8113-P60細胞,人舌癌細胞系 銅綠假單胞菌 大鼠肝細胞;BRL 3A3,4-Dixy7noxybenzoicacid原兒茶酸100毫克超,99%
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白5-Bromo-2'-Deoxyuridine 250mg/1g Sigma分裝
非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C三丁基化锍(>96.0%(T))Tributylsulfonium Iodide質量規格:>96.0%(T)
UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌螺[1,3,3-三甲基吲哚苯并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]質量規格:>98.0%(HPLC)(T)
人急性母細胞性細胞;MOLT-4 大鼠肺動脈成纖維細胞完全培養基 100mL1,3,3-三甲基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]質量規格:>98.0%(HPLC)(T)
心房肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,3-二苯基-3H-萘并[2,1-b]吡喃(>98.0%(HPLC))3,3-Diphenyl-3H-naphtho[2,1-b]pyran質量規格:>98.0%(HPLC)
C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫靛紅Thioindigo質量規格:
病毒4型PCR檢測試劑盒直銷PANC-1細胞,人細胞 人橫紋癌細胞,A673細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;MEFPR171關鍵中間體IVBoc-HPh-Leu-Phe-Ome質量規格:>97%
HO-8910(人細胞) 5×106cells/瓶×2Pneumadin,大鼠Pneumadin (rat)質量規格:>95%,BR
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(人細胞分離液) 100ml朊病毒肽(106-126),人Prion Peptide (106-126),Human質量規格:>95%,BR
人成纖維細胞裂解物HMFL前腎上腺髓質素(1-20),人Proadrenomedullin (1-20)(human)質量規格:>95%,BR
AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 前腎上腺髓質素(45-92),人Proadrenomedullin (45-92)(human)質量規格:>95%,BR
SERPINA12 Protein Human 重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標簽)鈣100克
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞完全培養基 100mL錄鉑醋(+4℃) CHLOROPLcTINIC cCID HqXcHYDRcTq 18497-13-7
人癌細胞;MDA-MB-468甘油 (細胞培養級) Glycerol (cell culture tested, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑
人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )EOSINYwo7iumSALT伊紅Y鈉生物染料級橙紅色粉末RTsigma
CM-R080大鼠大隱內皮細胞完全培養基100mLD-Trehalose 5g/10g/250g原裝 Sigma T5251
特點優勢:
1. 特異性:病毒4型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。