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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3798 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
【產品名稱】: 單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Herpes Simplex Virus(HSV)2PCR
【貨號】: BKP3798
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) ,英文名或英文縮寫:wo7ium metasilicate nonahydrate,級別:CP,70%,規格:5克
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7膽紅速(+4℃) Bilirubin 632-62-4
EPHA7 Others Human 人 EphA7 / EHK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴代,英文名或英文縮寫:1-Bromooctane,級別:AR,47.8%,規格:100克
CL-0225SW620(人細胞)5×106cells/瓶×2BOC-Nim-芐基-L-組酸5克RT,避光
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 小鼠T細胞瘤(SV40T抗原轉染),Cyc-tAg細胞 HMy2.CIR(人B 母細胞)Peptonepacto 100g/500g原裝 BD 211677
大鼠腎系膜細胞;RMC塞來昔布羧酸Celecoxib Carboxylic Acid質量規格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 細胞,HeLa 229細胞 EAC-E2G8細胞,鼠腹水瘤4'-反式-羥基西洛他唑4'-trans-Hydroxy Cilostazol質量規格:美國進口
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-23,4-脫氫西洛他唑3,4-Dehydro Cilostazol質量規格:美國進口
POSTN Others Mouse 小鼠 POSTN / OSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 西洛他唑-d11Cilostazol-d11質量規格:美國進口
胃粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)去二甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽Didemethylchloro Citalopram Hydrochloride質量規格:美國進口
腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)苝(升華提)(>99.0%(GC))Perylene (purified by sublimation)質量規格:>99.0%(GC)
CA46細胞,人Butts瘤細胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT細胞 人肝臟星形細胞裂解物HHSteCL1,1,4,4-四苯基-1,3-丁二1(>99.0%(HPLC))1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene質量規格:>99.0%(HPLC)
NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞) 5×106cells/瓶×28-羥基米氮平β-D-葡萄糖苷酸8-Hydroxy Mirtazapine β-D-Glucuronide質量規格:美國進口
CCRF-CEM(人急性細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP8-羥基米氮平8-Hydroxy Mirtazapine質量規格:美國進口
綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFPN,N-二乙酰 去-5'-氯-4-氟代芐基莫沙必利N,N-Diacetyl Des-5'-chloro-4-fluorobenzyl Mosapride質量規格:美國進口
單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書Hut-102(人皮膚T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2(R)-(+)-4'-羥苯基卡維地洛質量規格:美國進口(R)-(+)-4'-Hydroxyphenyl Carvedilol
Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 內皮細胞生長培養基MV(即用型) 500ml4'-芐氧基卡維地洛質量規格:美國進口4'-Benzyloxy Carvedilol
人食道上皮細胞裂解物HEEpiCL卡維地洛-甲基-d3質量規格:美國進口Carvedilol-methyl-d3
HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 卡維地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)質量規格:美國進口Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)
人結直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15](S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。