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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3825 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
66人病毒6型通用PCR檢測試劑盒直銷 | Human Herpesvirus6(HHV6)6PCR | BKP3825 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NCI-H661(人大細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 腎上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2′-脫氧肌苷-5′-三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:5克
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)十五醇 1-Pentadecanol,99% 629-76-5 1G 通用試劑
TF Others Rat 大鼠 ansferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照) 石墨分;;筆 Grcphitq powdqr;Blcck lqcd;Minqrcl ccrbon 778-4-2
人腎上腺皮質癌細胞;SW-13Heparinwo7iumsalt肝嶙脂鈉鹽1克BR,1500-3000u/mg
貓源細胞 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞,COS-1細胞 AtT-20細胞,小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素)7446-8-4兒仰化硒Selenium dioxide
U266B1 [U266], 人細胞脫氟帕羅西汀鹽酸鹽Defluoro Paroxetine, Hydrochloride質量規格:美國進口
人導管瘤細胞;BT-474 大鼠腎動脈內皮細胞完全培養基 100mL帕羅西汀馬來酸鹽Paroxetine maleate質量規格:美國進口
MFC 小鼠細胞4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide質量規格:美國進口
IL21R Others Human 人 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide質量規格:美國進口
小鼠細胞;BC3H1去甲基吡羅昔康(吡羅昔康雜質B)Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B)質量規格:美國進口
66人病毒6型通用PCR檢測試劑盒直銷人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RATPCKTPCK質量規格:>97%,BR
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1 腺癌細胞,LS 174T細胞 RPC細胞,大鼠垂體細胞L-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽(s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride質量規格:0.98
CNE1, 人細胞系 HumanD-丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-D-Ala-OEt·HCl質量規格:>98.5%,BR
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照) 利格列汀;利拉利汀Linagliptin質量規格:>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑
前脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-谷氨酸-α-芐酯L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester質量規格:>98%,BR
SUP-B15(人Ph+急淋細胞系) 5×106cells/瓶×2分子篩13X型100U2~8℃
Hepa 1-6(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質母細胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]2,4,5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3
人卵巢;PA-1礦物油100毫克
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細胞裂解液 (陽性對照) 硅藻土載體1克2~8℃
CL-0433RWPE-2(人正常細胞)5×106cells/瓶×22409-55-42-叔丁基對2-tert-Butyl-4-metxylpxenol
特點優勢:
1. 特異性:66人病毒6型通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。