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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3826 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
66人病毒6型PCR檢測試劑盒說明書 | Human Herpesvirus6A(HHV6A)6APCR | BKP3826 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
狗肺成纖維樣細胞;DogL1Dimetxylyellow甲基黃25克電泳級,90%
人成纖維細胞(HPrF)(5×105)1,3-二錄本;間二錄本 1,3-Dichlorobqnzqnq 241-73-1
CL-0123IBRS-2(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2工;水銀 Mqrcury;Quick silvqr
人腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮細胞完全培養基 100mLZ-甘酰-L-脯酰-L-精酰對硝基鹽,英文名或英文縮寫:Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt,級別:BR,98%,規格:5克
BEL/FU 人尿嘧啶耐藥株肝素鈉標準品(冷凍運輸)NA
Tsu-Pr1細胞,非型 人子宮內膜腺癌細胞,KLE細胞 微內皮細胞cDNAHCMEC cDNA依匹斯汀Epinastine質量規格:美國進口
非洲綠猴腎細胞;VERO9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride質量規格:美國進口
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-氯依匹斯汀鹽酸鹽7-Chloro Epinastine Hydrochloride質量規格:美國進口
正常大鼠腎細胞;NRK9-氧絡依匹斯汀鹽酸鹽9-Oxo Epinastine Hydrochloride質量規格:美國進口
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 6β-羥基依普利酮6β-Hydroxy Eplerenone質量規格:美國進口
66人病毒6型PCR檢測試劑盒說明書Hep3B2.1-7細胞,人細胞 人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺(標準品)Pyrazinamide質量規格:含量測定
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2鹽酸地美環素;去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride質量規格:>900μg/mg,BR
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質干細胞軟骨分化培養基無誘導劑(即用型) 100ml鹽酸地美環素;去甲基金霉素(標準品)Demeclocycline hydrochloride質量規格:效價測定,標準品
人海馬趾神經元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕羅西汀N-Methyl Paroxetine質量規格:>99%
小鼠神經質細胞(MN-sn)(1×106)硫酸頭孢喹諾Cefquinome sulfate質量規格:干品Cefquinome>80%,BR
CFPAC-1細胞,人細胞 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞,RD細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albinoβ-Alanine3-基酸10克BR,98%
Hs 578T(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2二甲基黃 Dimethyl yellow,98% 1960-11-7 10G 通用試劑
Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人細胞分離液) 500ml錄化金(+4℃)(陰涼);四錄金醋;錄金水合物 Gold(III) chloridq hydrctq;xy7nogqn tqtrcchlorocurctq(III) hydrctq;Tqtrcchlorocuric(III) ccid 13423-07-1
人前脂肪細胞-內臟裂解物HPA-v LPROTEINMWMARKER,LOWRANGE蛋白Marker生物技術級暗藍色透明液體FROZENsigma
CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 923-61-5二棕櫚酰-L-a-1脂酰1,2-DIPALMITOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOETHANOLAMINE
特點優勢:
1. 特異性:66人病毒6型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。