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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人鼻病毒9PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3858
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-03-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3858
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

人鼻病毒9PCR檢測試劑盒說明書

Human Rhinovirus 9 9 PCR

BKP3858

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人鼻病毒9PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
MSTO-211H(人細胞) 5×106cells/瓶×2β-蛋白組學(xué)級100MLRT

Promocell C-24010 MelanocyteGrowthMedium , 色素細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml拂化輕銨;醋性拂化銨 cMMoniuM bifluoridq

骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf鄰本二加醋二丁酯 dibutyl phthclctq 84-74-

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 溴綠10

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17(腦浸粉)
SELL Others Human
SELL / CD62L / L-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 胰蛋白酶1:2500Trypsin 1:2500 from Porcine pancreas質(zhì)量規(guī)格:>2500U/MG

LTK 小鼠結(jié)締組織纖維細胞阿利苯多Alibendol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CM-H026人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL核糖核酸酶A(美侖)RNase A;核糖核酸酶IRibonuclease A from bovine pancreas質(zhì)量規(guī)格:≥50 U/mg,美侖

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株5-1酸吡哆醛,一水Pyridoxal 5-phosphate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

;Calu-3 大鼠氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLNADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏)Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)質(zhì)量規(guī)格:>95%,羅氏進分
人鼻病毒9PCR檢測試劑盒說明書INSR Others Human Insulin Receptor / INSR / CD220 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 表兒茶素沒食子酸酯ECG 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%BR

CM-H126人小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基100mL萊苞迪甙ARebaudioside A質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

HT-29, 人細胞 貂肺上皮細胞,Mv1Lu細胞 SW620 [SW-620](人腺癌細胞)萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)Rebaudioside A質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠子細胞;U14環(huán)亮氨酸甲酯鹽酸鹽Cycloleucine Methyl Ester.HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%

IL7R Others Human IL7Rα / CD127 人細胞裂解液 (陽性對照) 水溶性四氮唑-3GLT003質(zhì)量規(guī)格:BR
CCC-HEL-1
細胞,人胚肝二倍體細胞 小鼠腹水瘤細胞,SAC-II B2細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細胞;B95-8大黃酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%BRRhein

MLTC-1(小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2大黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rhein

Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside

細胞大薊苷質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pectolinarin

TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) 大觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定spectinomycin


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