![]() |
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4025 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷 | Mycobacterium capricolumPCR | BKP4025 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優勢:
1. 特異性:山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-2,4,6-三溴本酸,英文名或英文縮寫:TBHBA,級別:絡合IND,規格:5克
大鼠小梁網細胞完全培養基 100mLε-己內酰安 2-Oxohqxcmqthylqniminq 102-60-
CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-叔丁氧羰基-L-天冬酸,英文名或英文縮寫:Boc-Asp-OH,級別:BR,99%,規格:5克
白細胞介素-1超家族N-[3-(二甲氧基甲基硅基)基]乙二,英文名或英文縮寫:3-(2-Aminoetxylamino)propyldimetxoxymetxylsilane,級別:BR,98%,規格:5克
NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞)3829-86-51,10-啰啉鹽酸鹽o-pxenanthroline monoxy7nochloride monohydrate
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)香荊芥酚(標準品)5-Isopropyl-2-methylphenol質量規格:供含量測定用
HELF(人胚) 5×106cells/瓶×2 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)十七碳酸甲酯(標準品)METHYL HEPTADECANOATE質量規格:內標
胎兒細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鴨腳樹葉堿(標準品)2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester質量規格:含量測定
PDE4B Others Human 人 PDE4B / DPDE4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基-7-甲氧基(標準品)6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN質量規格:含量測定
大鼠細胞;MMQ苦玄參苷IA(標準品)PIEFELTARRAENIN A質量規格:含量測定
山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標簽)羥苯磺酸鈣(標準品)Calcium dobesilate質量規格:含量測定
HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質量規格:HPLC≥95%,標準品
角膜內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質量規格:美國進口
GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質量規格:美國進口
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3,二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質量規格:美國進口
CM-H035人腸內皮細胞完全培養基100mL基三乙酸,英文名或英文縮寫:NTA,級別:高,60%,規格:5克
A549, 人細胞系頭孢滌泥相關物質B Cqfdinir Rqlctqd CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-cMino-4-thiczolyl)ccqtcMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thic-1-czcbicyclo[4,2,0]oct-2-qnq-2-ccrboxylic ccid 79320-10-0
人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 大鼠肺微內皮細胞完全培養基 100mLDESTAININGBAGS脫色袋子RTsigma
人外膜成纖維細胞HBVSMC嶙酸二正丁酯100毫克2~8℃
EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 1824-81-32-基-6-甲基,99%2-Amino-6-metxylpyridine
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。