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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP4026
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP4026
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書

Mycobacterium cheloeiPCR

BKP4026

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

大鼠細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]四乙基錄化shēng huà shì jì容量:5

PGC Others Rat 大鼠 Pepsinogen C / PGC 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二基 2,6-DiMqthylncphclqnq 281-4-0

B16 色素瘤3-羥基本酸,英文名或英文縮寫:3-xy7noxybenzoic acid,級別:CP99%,規格:50毫克

A549-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)人細胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin對硝基本基-β-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量:RT25

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白 (His 標簽)7440-69-9BisMuth
ECV-304
細胞,人臍內皮細胞 銅綠假單胞桿菌(綠膿桿菌) 人真皮成纖維細胞-RNAHDF-a NA小白菊內酯Parthenolide質量規格:0.8%內酯含量,BR

R 1610(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2小白菊內酯Parthenolide質量規格:>98%標準品

ES-2(人卵巢透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0263BGC-803(人細胞)5×106cells/瓶×2 貓腎細胞;F81利扎曲坦Rizatriptan質量規格:>98%

小鼠腎足細胞;Mouse podocyte地瑞那韋乙醇鹽Darunavir Ethanolate質量規格:>99%,BR

人小腦星形膠質細胞( Hac) (1×106 )維拉佐酮Vilazodone質量規格:>98.5%,BR
龜分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書SW480 [SW-480]人腺癌細胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBSβ-D-葡糖糖-6-1酸鈉鹽D-Glucose 6-phosphate  salt 質量規格:98%,美國進口

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖)Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)質量規格:>97%,國產美侖

人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse葡萄糖氧化酶Glucose oxidase質量規格:BR,>200U/mg

人癌細胞;MCF7溶菌酶(蛋清)Lysozyme,from egg white質量規格:2U/mg,分子生物學級

人臍內皮細胞(HVVEC)( 5×105 )HRP;辣根過氧化物酶Peroxidase, Horseradish(HRP)質量規格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg
SCARB1 Others Human
SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 朊病毒肽(106-126),人質量規格:>95%,BRPrion Peptide (106-126),Human

神經膠質細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)前腎上腺髓質素(1-20),人質量規格:>95%,BRProadrenomedullin (1-20)(human)

VIP Others Human Vasoactive iestinal peptide / VIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 前腎上腺髓質素(45-92),人質量規格:>95%,BRProadrenomedullin (45-92)(human)

小鼠Lewis瘤株;LLT蛋白激酶C19-31)質量規格:>95%,BRProtein Kinase C (19-31)

CCC-HPF-1細胞,人胚 小鼠腎系膜細胞,MC53細胞 CL-0098HCT-8(人盲腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2PLX4720質量規格:>98%B-RafV600E抑制劑PLX-4720
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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