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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4034
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4034
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300
、ABI7500LightCycler 480iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應(yīng)不超過72h-70以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u
運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書
【英文名稱】: Mycobacterium paratuberculosisPCR
【貨號(hào)】: BKP4034
組成及試劑配制:

酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2
、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
、 樣品稀釋液:1×20ml
4
、 檢測(cè)稀釋液A1×10ml。
5
、 檢測(cè)稀釋液B1×10ml。

副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3)
簡便、快速
PCR
反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在24 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)
對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100BR,粘度200 mpe.s

NK-92細(xì)胞,人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N.N-二基-1.3-炳二安 3-Diqthylcminopropylcminq 104-78-9

中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24ProcyanidinB2原矢車菊素B2500ulAR,99%

SLAMF1 Others Human CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲基綠shēng huà shì jì容量:1公斤

平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid
EB
病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9801 人脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紫花前胡苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Nodakenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf紫蓳靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Corynoline質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaline質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmitic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CV-1細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL王不留行黃酮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Vaccarin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Hepa 1-6(
小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美(標(biāo)準(zhǔn)品)Dexamethasone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人卵巢;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0433RWPE-2(人正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

SL-7細(xì)胞,胚肺細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書HPMEC-c 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)3-去氮腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口,97%3-Deazaneplanocin A HCl salt

神經(jīng)元生長添加物NGS4-氧代維甲酰酚胺質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口3-Keto Fenretinide

CA9 Others Canine Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-表米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口4-Epi Minocycline

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL?;敲撗跄懰徕c質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTaurodeoxycholic acid  salt

F81細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 NCI-H838 [H838](人細(xì)胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21rU1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRrU Phosphoramidite

PCR檢測(cè)試劑盒

 ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min
(5)4oC 12000g
離心15min。
(6)
仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g
離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。


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