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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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BL21(DE3) 感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63267
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63267
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

規格參數:

產品名稱:BL21(DE3) 感受態細胞
規格 :100ul*10 100ul*50
分類:表達感受態細胞  
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項:


1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。

植酸鈉質量規格:>98%,BRPhytic acid dodeca salt hydrate  英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規格:96T/48T  牛病毒(DV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

菊粉;菊糖質量規格:>90%,BRInulin from chicory  酵母β-內酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒20  人相關抗原(TAA)試劑盒 Human tumor-associated aigen,TAA ELISA Kit

固深紅 GBC質量規格:BS,90%Fast Garnet GBC Salt  ELISAKitDP人脫氧尿三1酸規格:48T/96T  1酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 ,英文名: PLC ELISA Kit

固紅 3 GL質量規格:BSFast Red 3 GL Salt  小鼠毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)ELISA試劑盒 ,英文名: CHRM2 ELISA Kit  Ratbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA試劑盒大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Ratglucocoicoidreceptor,GRELISA試劑盒大鼠糖皮質類受體(GR)ELISA試劑盒規格:96T/48T  13657-68-6莪術二酮品牌   Curdione

小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 ,英文名: TFR/CD71 ELISA Kit  17910-09-7莪術烯規格  Curzerene

小鼠心肌營養素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T  474-25-9鵝去氧膽酸   Chenodeoxycholic acid  

人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒 Human IerferonαAibody,IFNα-Ab ELISA Kit  474-25-9鵝去氧膽酸說明書   Chenodeoxycholic acid  

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規格:96T/48T  516-35-8?;蛆Z去氧膽酸品牌   Taurochenodeoxycholic acid

67920-52-9丹參素鈉品牌   Danshensu   組蛋白H3-K79乙?;瘷z測試劑盒10/20

67879-58-7單咖啡酰灑石酸品牌  2-Caffeoyl-L-tartaric acid   組蛋白H3-K79(mono/di/i)甲基化檢測試劑盒10/20

6754-58-1黃腐酚  Xanthohumol   組蛋白H3-K64乙?;瘷z測試劑盒10/20

66-97-7補骨脂素  Psoralen   組蛋白H3-K56乙酰化檢測試劑盒10/20

6681-18-1氯化木蘭花堿品牌  Magnoflorine chloride   組蛋白H3-K56(mono/di)甲基化檢測試劑盒10/20

BL21(DE3) 感受態細胞操作方法:

1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

聯系方式
手機:13564080845
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