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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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TB1 感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63282
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63282
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口
規格參數:

產品名稱:TB1 感受態細胞
規格 :100ul*10 100ul*50
分類:表達感受態細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

正癸酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Decanoic acid質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)  10%SDS500毫升  鯉春病毒(SVCV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))Undecanoic acid質量規格:Standard for GC,≥99.0%(GC)  MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T  HumanPolySeriumAigen,PHSAELISA試劑盒人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Undecanone質量規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)  小鼠巖藻糖基轉移酶8(F8)ELISA試劑盒 ,英文名: F8 ELISA Kit  ELISAKitCA鴨子酶規格:48T/96T

順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯(標準品)cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester質量規格:分析標準品  兔子促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T  Humancrystalproteinsβ,CryβELISAKit人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒規格:96T/48T

犬維生素K1(VK1)試劑盒 Canine Vitamin K1,VK1 ELISA Kit  39012-20-9胡黃連苷II說明書  Picroside II

英文名稱HumanansformingGrowthfactorβ1ELISAkit人轉化生長因子β1(TGFβ1)規格:96T/48T  64461-95-6胡黃連苷III品牌  Picroside III

超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒50  94-62-2胡椒堿規格  Piperine

RatGonadoopin-releasinghormonereceptor,GHRELISA試劑盒大鼠激素釋放激素受體(GHR)ELISA試劑盒規格:96T/48T  38226-86-7脫水淫羊藿素  Anhydroicaritin

小鼠轉化生長因子β3(TGF-β3)ELISA試劑盒 ,英文名: TGF-β3 ELISA Kit  474-58-8胡蘿卜苷說明書  Daucosterol

5986-55-0百秋李醇說明書  Patchouli alcohol    豬粘膜地址素細胞黏附分子1(MADCAM1)試劑盒 Pig mucosal vascular addressin cell adhesion molecule 1,MADCAM1 ELISA kit

5957--80-2鼠尾草酚品牌  Carnosol  豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒 Pig mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA Kit

5945-50-6水晶蘭苷說明書  Monotropein  豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 Pig mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit

TB1 感受態細胞5945-50-6水晶蘭苷品牌  Monotropein  豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)試劑盒 Pig Mucin-2,MUC2 ELISA Kit

5940-00-1豯薟精醇規格  Darutigenol  豬粘蛋白/粘液素1(MUC1)試劑盒 Pig Mucin-1,MUC1 ELISA Kit

聯系方式
手機:13564080845
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