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M15(pREP4) 感受態細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產地：進口、國產

貨號：BK-G63291

發布日期： 2021-02-21
更新日期： 2025-03-13

發送咨詢信息

產品詳請

產地	進口、國產
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63291
用途	產品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規格	100ul10 100ul50
純度	%
是否進口	是

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

規格參數：

產品名稱：M15(pREP4) 感受態細胞
規格：100ul*10 100ul*50
分類：表達感受態細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項：

1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。

粘酸(>98%，BC)Mucic acid質量規格：>98%，BC 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測試劑盒MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T ELISAKitOH小鼠25羥基維生素D3規格：48T/96T

碲標準溶液(100μg/ml，基體:HCI)Tellurium standard質量規格：100μg/ml，基體:HCI 人衣原體抗體(Cpn-Ab)試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-Ab ELISA Kit ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規格：96T/48T

銩標準溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Thulium standard質量規格：1000μg/mL,基體：10%HCL RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規格：96T/48T 人基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒組裝/原裝

釩標準溶液(500mg/L,溶劑：水)Vanadium standard質量規格：500mg/L,溶劑：水 COLLAGENII蛋白共沉淀分析試劑盒5 小鼠膽酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 Mouse cholest erolester ansfer protein,CETP ELISA Kit

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒人β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格：96T/48T 136849-88-2灰氈毛忍冬皂苷乙品牌 Macranthoidin B

小鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒，英文名： TGF-α ELISA Kit 16830-15-2積雪草苷規格 Asiaticoside

小鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T 464-92-6積雪草酸 Asiatic acid

人抗SSB/La抗體試劑盒 Human ai-SSB/La aibody ELISA Kit 6902-91-6吉馬酮說明書 Germacrone

Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格：96T/48T 357-70-0加蘭他敏品牌 Galanthamine

557-61-9二十八烷醇說明書 Octacosanol 豬血漿激肽釋放酶(KLKB1)試劑盒 Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit

55750-84-0西紅花苷II說明書 Crocin II 豬血紅蛋白(Hb)試劑盒 Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit

55576-66-4仙鶴草酚B規格 Agrimol B 豬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit

555-66-86-姜烯酚 6-Shogaol 豬舒緩激肽(BK)試劑盒 Pig Bradykinin,BK ELISA Kit

55481-88-4大葉茜草素規格 Rubimaillin 豬生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測試劑盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

M15(pREP4) 感受態細胞操作方法：

1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

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