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IL-11 小鼠白介素11ELISA檢測試劑盒操作步驟

發(fā)表時間:2023-01-30
IL-11 小鼠白介素11ELISA檢測試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

ADRB2 腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體
Aggrecan1 軟骨蛋白聚糖抗體
ALAS-E 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體
ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2抗體
ARIP2B 激活素受體2B抗體
AIMP2 AIMP2抗體
ACHE 乙酰膽堿酶抗體
ALAS1 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
alpha Defensin 1 防御素α1/3抗體
ABCG4 ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體
ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)
A Raf A-Raf抗體
Phospho-A Raf(Ser299) 磷酸化A-Raf抗體
AMPD3 紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體
ABP 雄激素結(jié)合蛋白抗體
ALR 肝再生增強因子抗體
Amyloid Precursor Protein APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
AFP(A2) 甲胎蛋白單克隆抗體(包被)
AFP(A4) 甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)



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