人抗白蛋白抗體ELISA檢測試劑盒檢測方法
發表時間:2025-03-12
在樣本處理完畢后,即可進入正式的ELISA檢測步驟。首先,將處理好的樣本和標準品分別加入預先包被有白蛋白的96孔板中,每個孔中加入的體積需嚴格按照說明書操作,以確保結果的準確性。隨后,輕輕晃動孔板,使樣本或標準品均勻覆蓋孔底,然后置于37℃恒溫箱中孵育一段時間,讓抗體與白蛋白充分結合。
孵育結束后,取出孔板,棄去孔內液體,并用洗滌液反復洗滌數次,以去除未結合的抗體和雜質。洗滌完畢后,向每個孔中加入酶標二抗,同樣置于37℃恒溫箱中孵育。酶標二抗能夠與已結合在白蛋白上的抗體特異性結合,為后續的顯色反應做準備。
孵育結束后,再次洗滌孔板,然后加入顯色底物。在酶的作用下,顯色底物會發生顏色變化,且顏色深淺與樣本中抗白蛋白抗體的含量成正比。因此,通過觀察顏色變化并測定吸光度值,即可間接反映樣本中抗白蛋白抗體的含量。
最后,使用酶標儀在特定波長下測定各孔的吸光度值,并根據標準品的吸光度值繪制標準曲線。通過對比樣本的吸光度值與標準曲線,即可計算出樣本中抗白蛋白抗體的具體濃度。
整個檢測過程需嚴格控制實驗條件,避免污染和誤差,以確保檢測結果的準確性和可靠性。